Question

质粒dna的提取 琼脂糖凝胶电泳 为什么会出现正极拖尾

Answer 1

电泳出现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散。其原因，主要从以下两个方面考虑：
1、pcr产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差，dntp浓度过高，mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成pcr的非特异性产物
过多。
对策：①减少taq酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dntp的浓度。③适当降低mg2+浓度。④增加模板量，减少引物的用量
，减少循环次数，提高退火温度。
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液tae或者tbe的污染，建议更换缓冲液。（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。（3）电压太高。（4）适当把你的胶的浓度加大。（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照。
以前有挺多人问过这个问题了
借用下以往问题的最佳答案