请问一下,什么是菌液pcr?
菌液pcr是指菌液的聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。
扩展资料
转化的农杆菌R1000,EHA105,LBA4404 用碱裂解法提取表达载体pBTU质粒,筛选到转化子,计算转化率约为10~10。单菌落的菌体用特异引物进行PCR反应后扩增出目的基因,进一步证实直接从菌中扩增目的基因片段的方法是可行的。
经紫外分光光度计检测扩增产物的浓度为0.1~0.5μg/μl。试验发现某些已转化的单菌落质粒拷贝数少导致提取质粒困难,经PCR扩增反应后有些单菌落扩增出具有目的基因的转化子,可见 PCR扩增反应可快速鉴定出用质料提取方法无法确定出的转化子,提高了鉴定水平和效率。
参考资料来源:百度百科-PCR
2023-05-31 广告