基因表达载体的构建所需的条件
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作为重组基因的载体,
1,必须能够在宿主细胞中复制,使重组基因能够在宿主基因中复制,从而稳定保存下来,这是作为运载体的必须条件。
2.具有多个限制酶切点,从而可以使不同的粘性末端与之相连,增强实用性
3.拥有标记基因是为了方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来,以便检测目的基因是否导入受体。
下面说说 载体所需的序列结构
目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段,比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子:启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译,到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚RNA的转录翻译过程,可以再细说。
标记基因:用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体。比如抗虫棉,判断是否植入,用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因(如果目的基因成功植入,抗四环素基因也一起植入),然后用四环素来淘汰植入失败的个体,剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因,还有荧光基因等,总之就是方便检测。
应该很详细了吧。。。
1,必须能够在宿主细胞中复制,使重组基因能够在宿主基因中复制,从而稳定保存下来,这是作为运载体的必须条件。
2.具有多个限制酶切点,从而可以使不同的粘性末端与之相连,增强实用性
3.拥有标记基因是为了方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来,以便检测目的基因是否导入受体。
下面说说 载体所需的序列结构
目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段,比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子:启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译,到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚RNA的转录翻译过程,可以再细说。
标记基因:用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体。比如抗虫棉,判断是否植入,用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因(如果目的基因成功植入,抗四环素基因也一起植入),然后用四环素来淘汰植入失败的个体,剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因,还有荧光基因等,总之就是方便检测。
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