求助,RNA电泳无条带,原因

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鹅子野心
2018-02-17 · 知道合伙人教育行家
鹅子野心
知道合伙人教育行家
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获得广东工业大学博士学位

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原因是DNA降解了,都是小片段,所以跑的很快,使得DNA电泳图上无条带,而核苷酸的A260〉RNA〉DNA的,所以DNA降解会使吸光度值上升
RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶,不同的RNA条带也能分开,但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下,RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时,一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时,配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。
基本过程同DNA电泳一样,但应明确一点的是,因为RNA分子对RNA酶的作用非常敏感,因此必须用对RNA酶有抑制作用DEPC水来配置所有溶液,所有与RNA接触的仪器和装置都要严格处理以尽量减少RNA酶对样品的降解;另外,因为RNA分子有二、三级结构可以影响其电泳结果,因此电泳时应在变性剂存在下进行,常用的变性剂为甲醛和戊二醛
研载生物科技(上海)有限公司_
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