PCR技术基本原理

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GRS塑料 2024-11-04
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洁思隆新材料(苏州)有限公司是一家专注于PCR材料再生和科研的公司,为创造更加安全、舒适、纯净,便捷的人类生活提供全新的材料解决方案的新材料企业。推动人类生活环境的持续改善,创造美好生活。

洁思隆新材料(苏州)有限公司座落在有着“上有天堂,下有苏杭”之称的苏州,它也是一座园林城市。一座有底蕴的美丽城市,一家有责任的新兴公司。我们会在这花园的城市里,萃取自己的产品,不忘初心,为青山绿水,贡献自己的一点力量!

洁思隆新材料(苏州)有限公司,已深耕塑料行业多年。近年来随着经济的发展,环境的污染成为社会的主要议题,洁思隆新材料(苏州)有限公司认为一个有社会责任感的公司要为社会碳中和贡献自己一点力量。为此公司决定致力于塑料的循环利用,再生料的溯源,化学品的使用,环境的保护,社会责任的提升,洁塑隆一直在行动。

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一、PCR技术基本原理有:

1、PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

2、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:

①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;

②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;

③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

二、PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。

扩展资料:

1、PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。

2、PCR反应用耐高温的TaqDNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

参考资料:百度百科-PCR

三英精密仪器有限公司
2021-03-19 广告
PCR技术(聚合酶链式反应)由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成: ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准... 点击进入详情页
本回答由三英精密仪器有限公司提供
擎科生物
2023-01-16 · 生物科技让世界更美好
擎科生物
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PCR又叫作聚合酶链式反应,其扩增步骤包括三个连续步骤。(1)变性:是利用DNA在体外高温时变性,双链解离变成单链;(2)退火:低温时引物与单链按碱基互补配对的原则结合;(3)延伸:再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5’- 3’)的方向合成互补链的过程。将这三个步骤重复(“循环”)25-35次,即可按指数方式获得精确的目标DNA拷贝。
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