Question

怎样用液氮罐直接冻存细胞

技师提供冻存细胞方法为4度2小时，－20度2小时，－70度然后放入液氮。但最近－70冰箱坏了，所以想要液氮罐直接冻存。－20度拿出以后放在液氮液面以上多高处可以？多长时间？才可放入液氮里？

Answer 1

天驰液氮罐 工作人员建议，细胞株的冻存方法可按以下步骤操作：
（1）取培养2～3天生长旺盛的细胞，用细胞培养液将细胞配成2×106～2×107/ml。
（2）在1ml细胞冻存管中加入0.5ml细胞悬液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亚砜（或甘油），混匀后密封。置4℃ 1小时，－20℃ 2小时，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上过夜后浸入液氮中。

Answer 2

班德液氮罐yedanguan365目前已研究出多种胚胎冷冻保存方法，包括慢速冷冻法、快速冷冻法、一步冷冻法、直接移植冷冻法和玻璃化冷冻法等。其中玻璃化冷冻法的步骤如下：

①将胚胎在室温下放人25%玻璃化溶液(VS液)中预处理15min;

②将预处理后的胚胎放在高浓度(75%一90%)的VS液中保存20—40min;

③将经过两步抗冻剂处理的胚胎直接投入液氮中保存。