蛋白质含量测定方法

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应该是问蛋白质含量测定的方法吧。方法有以下几种:
1、直接测定UV法。
2、凯氏定氮法。
3、双缩脲法。
4、酚试剂法。
5、紫外吸收法。
6、BCA法。
7、Lowry法。
8、考马斯亮蓝法。
9、Bradford法测定试剂盒。
蛋白质含量增高,常见于多发性骨髓瘤患者,主要是异常球蛋白增加;血浆浓缩也可使蛋白质含量增加,如急性脱水、外伤性休克、肾病等。
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蛋白质含量测定分析方法有:马斯亮蓝法(Bradford)、Folin酚试剂法(Lowry)、BCA法等。
蛋白纯化是目前生物研究邻域中较为热门的一个大方向,其中蛋白含量测定是纯化过程中很重要的一项内容。
Folin酚试剂法(Lowry)是目前最灵敏的测定方法,但耗费时间长,操作需严格计时,颜色深浅随不同蛋白质而变化,因为其中的酒石酸钾-硫酸铜试剂配置保存困难,逐渐被考马斯亮蓝法取代。
考马斯亮蓝法(Bradford)是采用考马斯亮蓝G250染料与蛋白质结合,应用广泛,颜色稳定,专一性较差,干扰物质多。
BCA法主要基于双缩脲原理,用于快速检测,抗干扰能力强,但受金属螯合剂影响。
每种测定方法都不是完美无缺的,都有其优缺点,在选择时应考虑:试验所要求的灵敏度和精确度;蛋白质的性质;溶液中存在的干扰物质;测定时所耗费的时间等因素。就具体情况选择最合适的试验方法。
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