大肠杆菌提取的质粒有哪三种构型
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利穗科技
2024-04-23 广告
2024-04-23 广告
大肠杆菌质粒裂解系统是一种常用的生物技术工具,用于从大肠杆菌细胞中提取质粒DNA。该系统利用特定的化学物质或酶,破坏大肠杆菌细胞的细胞壁和细胞膜,使质粒DNA得以释放。随后,通过离心和纯化步骤,可以从裂解物中分离出高质量的质粒DNA。这一过...
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在琼脂糖凝胶电泳中存在三条电泳条带,按照Marker的位置从大到小依次为:线性DNA,松散的环状DNA,超螺旋结构DNA(在松散环状DNA的基础上进一步盘曲折叠形成的紧致的环状DNA)
其实这三种结构分子量相同,由于空间结构的差异导致在琼脂糖凝胶电泳中迁移率不同,因此出现三条条带。
标准的质粒提取实验中只存在后两种结构,线性DNA是由于提取操作过于剧烈或缓冲溶液pH不适宜造成的DNA断裂。过于震荡可造成电泳条带拖尾现象。
其实这三种结构分子量相同,由于空间结构的差异导致在琼脂糖凝胶电泳中迁移率不同,因此出现三条条带。
标准的质粒提取实验中只存在后两种结构,线性DNA是由于提取操作过于剧烈或缓冲溶液pH不适宜造成的DNA断裂。过于震荡可造成电泳条带拖尾现象。
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