Question

柱层析的基本操作过程

Answer 1

柱层析的基本操作过程：主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。

常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ，但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ，并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ，以及有些易分解的化合物也难以得到 ，而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。

加压分离可以加快淋洗剂的流动速度 ，缩短样品的洗脱时间，是一种比较好的方法 ，与常压柱类似 ，只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气 ，双连球或者小气泵等。

柱层析技术也称柱色谱技术。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相，将混合样品加到柱子上后用特别的溶剂洗脱，溶剂组成流动相。

在样品从柱子上洗脱下来的过程中，根据混合物中各组分在固定向和流动相中的分配系数不同经过多次反复分配，将不同组分逐一分离。根据填充基质和样品分配交换原理不同，离子交换层析，凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离混合物的经典层析技术。