Question

层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响？

Answer 1

层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响，一般来说，高径比越大，分离效果越好。

高径比的提高可以带来以下几个方面的优势：

• 提高分离效率：高径比的提高可以增加层析柱的理论板数，提高分离效率。

• 提高分离精度：高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动，从而减小分子的扩散，提高分离精度。

• 提高样品载量：高径比可以增加层析柱的样品载量，从而提高检测灵敏度。

• 缩短分离时间：高径比的提高可以缩短分离时间，提高分离效率，提高生产效率。

但是，高径比过大也会导致层析柱内液体流动速度过慢，从而影响分离效果。此外，高径比还会增加层析柱床的压力，可能会损坏柱床，限制层析柱的应用范围。

因此，在实际应用中，需要根据具体的样品和分析目的，综合考虑各种因素，选择适当的高径比。一般而言，高性能液相色谱（HPLC）中，高径比可以达到10-50，而气相色谱（GC）中高径比则可以更大。

Answer 2

影响层析柱整体渗透速度分布不均，导致色素带不是整齐的环状色素带，进而增长分离各色素的时间。

如何避免:

应在装填层析柱前用适量的丙酮润洗一下，后在装入氧化铝时应边加边敲打层析柱使氧化铝殷实，然后用真空抽滤方法，用乙醚进行抽滤至无气泡就行。

层析柱的高径比如何影响树脂分离效果:

层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。