Question

层析柱的高径比如何影响树脂分离效果

Answer 1

　　理论上来说高经比越大，树脂分离效果越好（即塔板数越多）。
　　层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在精确分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。

Answer 2

理论上来说高经比越大，树脂分离效果越好（即塔板数越多）。不过考虑到实际操作，并不是高经比越大越好，一般只要能达到分离效果就可以了。因为高经比越大，柱压越高，对附属设备要求增加，如要高压泵，耐压管路等。所以生产上，特别是层析填料颗粒较细时，往往采用矮胖型柱子。

追问

矮胖的可能处理量大，高细的处理量较少。唉，估计要做大量的实验了