什么是PCR扩增目的基因?
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2019-06-15 · 农业农村部直属的大型综合出版社
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PCR扩增技术已广泛地用于分离目的基因。如果知道目的基因的全序列或其两侧的序列,可以通过合成一对与模板DNA互补的引物,十分有效地扩增出含目的基因的DNA片段,采用常规PCR技术扩增分离目的基因比较方便,但必须知道待扩增目的基因DNA片段的核苷酸序列,或者至少要求DNA片段两端长约20bp的序列是已知的,这样才能设计PCR引物进行有效做PCR扩增反应。
此外,利用常规PCR反应,允许扩增的DNA片段长度一般在1kb以内,超过1kb时扩增效果显著下降。对于扩增未知核苷酸序列的目的基因,或是那些长达几千碱基对的大基因,则需要选择特殊类型的PCR策略,目前已采用的有套式PCR、反向PCR、不对称PCR、锚定PCR、长程PCR、反转录PCR、锅柄PCR和AluPCR等。
研载生物科技(上海)有限公司_
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PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成...
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