蛋白质沉淀有哪几种方法?哪些是可逆的沉淀反应
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蛋白质沉淀 蛋白质在溶液中的稳定性是有条件的、相对的.如果条亮笑斗件发生改变,破坏了蛋白质溶液的稳定性,蛋白质分子则聚集成大的颗粒沉淀出来.
蛋白敬磨质溶液的稳定性与质点大小、电荷和水化作用有关,只要破坏这些条件,蛋白质自然会从溶液中沉淀出.
沉淀蛋白质有以下方法:
1、盐析法
2、有机溶剂沉淀法
3、重金属盐沉淀法
4、生物碱试剂和某些酸(三氯醋酸,磺基水杨酸,硝酸等)沉淀法
5、加热变性沉淀法
蛋白质变性:蛋白质的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象.蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失.
蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀.
蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素,即颗粒表面的水化层和电荷.若无外加条件,不致互相凝集.然而除掉这两个稳定因素(升搭如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂)蛋白质便容易凝集析出.
可以看出,如将蛋白质溶液pH调节到等电点,蛋白质分子呈等电状态,虽然分子间同性电荷相互排斥作用消失了.但是还有水化膜起保护作用,一般不致于发生凝聚作用,如果这时再加入某种脱水剂,除去蛋白质分子的水化膜,则蛋白质分子就会互相凝聚而析出沉淀;反之,若先使蛋白质脱水,然后再调节pH到等电点,也同样可使蛋白质沉淀析出.
蛋白敬磨质溶液的稳定性与质点大小、电荷和水化作用有关,只要破坏这些条件,蛋白质自然会从溶液中沉淀出.
沉淀蛋白质有以下方法:
1、盐析法
2、有机溶剂沉淀法
3、重金属盐沉淀法
4、生物碱试剂和某些酸(三氯醋酸,磺基水杨酸,硝酸等)沉淀法
5、加热变性沉淀法
蛋白质变性:蛋白质的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象.蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失.
蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀.
蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素,即颗粒表面的水化层和电荷.若无外加条件,不致互相凝集.然而除掉这两个稳定因素(升搭如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂)蛋白质便容易凝集析出.
可以看出,如将蛋白质溶液pH调节到等电点,蛋白质分子呈等电状态,虽然分子间同性电荷相互排斥作用消失了.但是还有水化膜起保护作用,一般不致于发生凝聚作用,如果这时再加入某种脱水剂,除去蛋白质分子的水化膜,则蛋白质分子就会互相凝聚而析出沉淀;反之,若先使蛋白质脱水,然后再调节pH到等电点,也同样可使蛋白质沉淀析出.
知禾
2024-08-13 广告
2024-08-13 广告
欢迎来电咨询:13051765615 杨经理简介:转铁蛋白又称为血清转铁蛋白、β-1 金属结合球蛋白、TF。转铁蛋白主要存在于血浆中,是一种铁结合血浆糖蛋白,负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁,以三价铁复合物(Tf-Fe3+)的...
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楼主你粗派好,你说的蛋白质的沉淀有两种岩基贺,加轻金属盐(如氯化钠)之后会凝固,不过是可逆的,加足量的水后就变得澄清了。另一种是在加热,加入重金属盐(如醋酸铅),浓酸,或加入甲醛、乙醇等有机锋宽物之后会变性产生固态沉淀,这是不可逆的。
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蛋白质可逆沉淀一般发生在盐析的时候,即在蛋白质溶液中加浓盐溶液,让蛋白质析出,这种情况下蛋白质的空间构象依然完整,复溶后蛋白依然具有生物学活性.蛋白质不可逆沉淀乱此一般认为是蛋白质变性,即蛋白质在某些物理和谨罩化学因素作哗晌迅用下其特定的空间构象被破坏,从而导致其生物活性丧失.蛋白质可逆沉淀多用于提取纯化,例如利用盐析法从牛奶中制备酪蛋白.蛋白质不可逆沉淀可用于灭菌,消毒,例如医疗器械高温灭菌.
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