Question

PCR电泳为什么有这么严重的拖带

Answer 1

没有图比较难判断，但一般DNA不容易有拖带，建议往几个方向查找问题。

1. 模版是不是质量足够好，是不是加多了，是否可能混有大量降解的RNA？可以单独跑个胶验证一下。

2. 是不是退火温度太低了，导致扩增了很多非特异性的片段出来，可以试着做个梯度的PCR找一下最适合的退火温度，或者更换有文献报道过的引物。

3. PCR的酶P别的有问题吗？会不会酶、BUFFER、镁离子哪个出问题了

4. 跑电泳的电泳槽是专门用来跑DNA的吗，会不会有人跑过RNA胶，而且上多了污染了整个电泳槽里的缓冲液，可以更换新的缓冲液试试。