Question

western blot图中，IP IB Flag HA是什么意思

求大神帮忙讲解一下这个图，不明白这图什么意思啊，左边那些VEGFR-3-Flag，p85α-HA IB:Flag IB:HA

都是什么意思啊,
大神，我稍微有点明白了，但还是有几点不明白：
（1）“从最右边看，表示细胞再转染了这三种质粒后，能够在细胞中表达”怎么看出来表达了?为什么要做lysate的westernblot图呢？
（2）你说的看最右边、中间、左边的图是指最右边、中间、左边上下两个图对着比较吗？（3）你说的“研究片段”指的是SH2?
(4 ) 还有拉不拉不出来怎么看？互相之间能被拉就是说有相互作用？比如说最左边的图是不是应该看左下图左右之间的条带粗细对比，中间的图是看中上图左右之间的条带粗细对比
（5）‘相互作用的位点不在其SH2上“ 这个结论不懂，既然是缺失SH2的P85不能被VEGFR拉出，但正常的P85能被VEGFR拉出,不正说明了作用位点在SH2上吗？
问题有点多，还望大神不吝赐教！菜鸟跪谢啦

Answer 1

IB是免疫印记、IP是免疫共沉淀、Flag和HA都是一种蛋白标签
从最右边看，表示细胞再转染了这三种质粒后，能够在细胞中表达，最左边的图是用带有Flag标签的VEGFR拉p85及其研究片段，从图中可以看出，p85被拉出，而其研究片段没有被拉出，中间的图是反过来用p85及其研究片段拉VEGFR，同样可以看出p85可以把VEGFR拉出，而其研究片段没有被拉出，结论是VEGFR与P85存在相互作用，但是相互作用的位点不在其SH2上

追问

这些概念我百度到了，主要是我不明白这图应该怎么看啊？

追答

后边我说的很详细了，希望能帮到你

追问

大神，能再帮我解答一下吧，问题有点多没法追问，我添加到问题里啦！谢谢！

追答

能不能拉出来都需要对比着条带的位置去看，如果那个地方有条带，代表能拉的出来。做lysate的westernblot图是为了证明质粒是可以正常表达的，也就是说质粒是没有问题的，这是前提。
由于毕业太久了，对一些表示方法有些淡忘，这里更正一下，非常抱歉，结论应该是VEGFR与P85存在相互作用，相互作用的位点在其SH2上。非常抱歉

追问

真的很感谢你耐心的解答！谢谢！