Question

薄层层析中常见的问题有哪些？

Answer 1

拖尾现象产生之原因及解决方法：

1、点样量太多，展开剂不能全部负载。

解决方法：寻出合适之点样量后，再进行层析。

2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时，常形成斑点拖尾。

解决方法：在展开剂中加入酸，使解离受到抑制，即可防止斑点拖尾。

3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时，常观察到斑点拖尾。

解决方法：在层析K值在10-3～10-8的碱性化合物时，展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。

4、吸附剂pH的影响。 由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。

解决方法：换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH，如加入酸或碱等。

5、吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等)，使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。

解决方法：采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。

扩展资料：

薄层色谱法的优点：

它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15～20分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高10～100倍。

它既适用于只有0．01μg的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。