Question

正相色谱法与反相色谱法比较

Answer 1

【答案】：(1)定义：正(反)相色谱法是流动相极性小(大)于固定相极性的液相色谱法。(2)固定相：正相色谱法使用极性固定相，如氰基、氨基键合相；反相色谱法使用非极性固定相，如C₁₈、C₈、苯基、二醇基键合相，或使用极性大的流动相，使用氰基、氨基键合相。(3)流动相：正相色谱法的流动相为烷基加适量极性调节剂；反相色谱法的流动相一般以水作为基础溶剂，加入甲醇、乙腈等有机溶剂调节极性。水相可以含有缓冲盐，可以加入酸或碱调节pH值。(4)应用范围：正相色谱法一般用来分离极性较大的化合物；而反相色谱法用来分离极性小或中等极性的化合物。(5)流动相极性对洗脱顺序的影响：在正相色谱法中，增加流动相的极性，如在正已烷-乙醇体系中，增加乙醇的比例，组分的t_R减小、k减小；在反相色谱法中增加流动相的极性，如在甲醇-水体系中，增加水的比例，则组分的t_R增大、k增大。(6)组分的极性与洗脱顺序的关系：在正相色谱法中，极性大的组分t_R大、k大；在反相色谱法中则正好相反，极性大的组分t_R小、k小。