Question

为什么测酶活力时已测初速度为宜,并且底物浓度应大大超过酶浓度

为什么测酶活力时已测初速度为宜,并且底物浓度应大大超过酶浓度

Answer 1

底物浓度大，可以保证酶的底物结合位点全部结合，处于饱和状态，此时酶的反应速度最大。但是随着反应的进行，产物会对酶的活性产生反馈性抑制，所以测初速度可以避免这种抑制的影响。

其实，测酶活性不应该只用一个底物浓度，而是逐步增加。这样就可以绘制反应曲线，不仅得到Vmax, 还可以得到S50，也就是1／2Vmax时底物浓度，这是一个反应酶活性的重要指标。