Question

土豆种怎么脱毒？

Answer 1

1．脱毒种薯生产
（1）茎尖培养（离体培养）技术 ①选择材料和灭菌。供培养用的茎尖要取自活跃生长的芽，顶芽的茎尖生长要比取自腋芽的快，成活率也高。为了容易获得无菌的茎尖，应把供试植株种在灭过菌的盆土中，并放在温室中进行栽培。还应注意浇水时不要浇在叶片上。对于田间种植的材料来说，还可以切取插条，插在实验室的营养液中。由这些插条的腋芽长成的枝条，要比从田间植株上直接取来的枝条污染少得多。另外，还可以给植株定期喷施内吸杀菌剂，如多菌灵（0.1%）和链霉素（0.1%）的混合液就十分有效。 经过以上措施处理，加上茎尖分生组织被彼此重叠的叶原基保护，只要仔细剥取，无须表面消毒就能得到无菌的外植体。如果是直接从田间取材或为保险起见，在切取外植体之前必须进行表面消毒。消毒的方法是将顶芽或侧芽连同部分叶柄和茎段一起在0.1%次氯酸钠中处理8～10min。 ②剥离茎尖和接种。剥离茎尖一般在超净台上进行，同时还需要解剖镜、解剖针和刀片。
（2）解剖时必须注意使茎尖暴露的时间越短越好，因为超净台的气流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干。所以在选择解剖镜的灯源时，以荧光灯或玻璃纤维灯为好。同时在材料下要垫上一块湿润的无菌滤纸。在解剖镜下剥取茎尖时，一手用一把细镊子将茎芽按住，一手用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直至露出圆亮的生长点。这时可以将这一茎尖切下，茎尖可带有1～2个叶原基或没有，然后将其接种到培养基上。要注意确保所切下的茎尖不能与已经剥去部分、解剖镜台或持芽的镊子接触，尤其是当芽未曾进行过表面灭菌时更须如此。 ③培养。培养的关键是将脱毒后的茎尖诱导产生有完整根、茎、叶的植株，因此选择适合的培养基就显得十分必要。对于马铃薯的茎尖培养来说，MS和Miller基本培养基都是较好的选择，而且，附加少量（0.1～0.5mg/L）的生长素或细胞分裂素或二者都加，培养效果更好。 茎尖的发育对培养器皿的要求不大，从减少污染和节约培养基的角度考虑，以15cm×2cm的试管为宜，每管盛10ml培养基，接茎尖一个。这样就不会因为一个茎尖的污染而导致其他茎尖同时污染。