Question

微生物培养如何计算酵母菌的数量

在探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验中，需利用计数板对微生物细胞进行直接计数．计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内．计数室由25×16=400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm3．某同学操作时将1mL酵母菌样品加99mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数． （1）在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的：①从静置试管中吸取酵母菌培养液加入计数板进行计数，并记录数据；②把酵母菌培养液放置在冰箱中；③第七天再取样计数，记录数据，统计分析绘成曲线． 请纠正该同学实验操作中的3处错误： ①___； ②___； ③___． （2）在实验前应该对计数板、吸管等器具进行___处理． （3）如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采取的措施是． （4）如果观察到如图所示a、b、c、d、e 5个大格共80个小室内共有酵母菌48个，则上述1mL酵母菌样品中约有酵母菌___个；要获得较为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做___．

Answer 1

（1）根据探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验步骤，该同学实验操作中有3处错误，纠正如下：
①应将试管轻轻震荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数；
②应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养；
③应连续七天，每天观察、取样计数并记录数据．
（2）为了避免杂菌污染，实验中所用吸管、计数板等器具需进行灭菌处理．
（3）如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，就需要对培养液进行适当的梯度稀释．
（4）根据题意可知，80个小室内共有酵母菌48个，则整个计数室酵母菌数量=48÷80×400=240个，并且酵母菌样品稀释了100，因此上述1ml酵母菌样品中约有菌体=240÷（0.1mm ³ ×10 ^-3 ）×100=2.4×10 ⁸ 个．为避免偶然误差，需要多次计数，求平均值．
故答案为：
（1）①应将试管轻轻振荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数
②应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养
③应连续七天，每天观察、取样计数并记录数据
（2）灭菌　
（3）适当稀释
（4）2.4×10 ⁸ 　多次计数，求平均值