Question

高中生物，基因工程，回答一下下面的问题？

第五问，为什么增加了DNA连接酶，比值不增大？X-1的数量是一定的。DNA连接酶多了，X-4不应该也多了吗？而此时X-1的含量减少，比值不应该会增大吗？为什么答案是不变呢？

Answer 1

用限制酶E1切开质粒X-1后,质粒-1暴露出两个粘性未端,Apr被切下.两端用E1切开的Tcr基因含有与上述切割后的质粒X-1,Apr有相同的粘性未端,混合后可形成Ⅹ-1、Ⅹ-2

因为用E1切割质粒后，会形成Apr基因和断了的质粒，与用E1切割的Tcr基因混合后，会出现三种情况：1.断了的质粒自身环化，形成X-3，；2.断了的质粒与Apr基因恢复连接，形成X-1；3.断了的质粒与Tcr基因连接，形成X-2。

而X-4是在E2的切口处插入了Tcr基因，没有用到E2，所以E2处不会断裂，不符合题意，所以X-4不增加。

追答

第五问中的DNA连接酶没有选择作用，他不会专门作用于X-1或者X-4

追问

有用到E2,题目中问的是TCR与用E2切开的X-1混合

Answer 2

DNA连接酶只是催化剂，它的多少不能改变不了细胞的比值。

Answer 3

这道题说实话不严谨，增加酶量有可能提高连接产物的量，因为在做实验的时候，你是没办法确定最适酶量的。