Question

您说茎环反转时可以同时反转好几个miRNA，引物不冲突吗？对后期表达验证有无影响？用的什么反转酶啊？

Answer 1

反转录是不会冲突的，后期表征所需的QPCR引物下游引物是根据反转录的茎环引物设计的，而上游引物特异性要求则很高，是特异性针对某一miRNA的序列来设计的

Answer 2

可能这得看你的运气了～我每次反转录三四个都没有问题的～
因为大部分的引物序列都是一样的～所以没事～不会错配～但是并不排除发生错配的可能～
我们就有人反转录不出来～U6都出不来～那就分开弄～我没也就是普通的反转录的酶～m-MLV啊～Ace啊～都行的～我喜欢那个东洋纺的试剂盒 ～挺好用的～