Question

博凌科为RNApure 高纯总RNA快速抽提试剂盒（离心柱型）提取总RNA的工作原理及提取d得率如何

Answer 1

博凌科为RNApure 高纯总RNA快速抽提试剂盒（离心柱型） 一种全新的以异硫氰酸胍/酚为基础的RNA提取方法。本试剂盒中每个离心柱每次可处理50-100 mg组织或5×106细胞，可同时处理大量不同样品。15分钟左右即可完成反应，提取的总RNA得率更高，纯度更大，没有DNA和蛋白的污染，可用于Northern Blot、Dot Blot、mRNA提取、cDNA合成等。百泰克丰富的经验告诉你如何解决一些常见的问题（诸如RNA产量低、OD260/OD280<1.6、基因组DNA污染、RNA降解，完整性不佳、下游的RT-PCR实验不成功等）

原理简介：
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA 酶， 然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜上， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase-free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
从动物组织中提取总RNA。
如果样品为脾、脑、肺和胸腺等组织难以裂解的组织，应适当加大裂解的用量。

试剂盒组成、储存、稳定性
试剂盒组成 保存 20次（RP1201） 50次
（RP1202）
裂解液RL 4℃避光 25 ml 55 ml
去蛋白液RE 室温 15ml 30ml
漂洗液RW 4℃（一个月）
-20℃（长期） 6 ml 15 ml

第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O 室温 5 ml 10ml
70%乙醇 室温 4ml RNase-free H2O 9ml RNase-free H2O
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free
吸附柱RA 室温 20个 50个
收集管（2ml） 室温 20个 50个

本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

特点：
◆ 快速--- 15-25分钟完成实验
◆ 高纯--- 通过离心柱特异性吸附,多次漂洗去蛋白。
◆ 重复性好---进口特制吸附膜。

提取范围:
细胞，组织，细菌，真菌，某些植物

产量:
每1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.肝和脾，6～10μg
2.肾，3～4μg
3.骨骼肌和脑组织，1～1.5μg
4.胎盘，1～4μg
5.上皮细胞(1×106 cultured cells)，8～15μg
6.纤维母细胞(1×106 cultured cells)，5～7μg