高效液相色谱基线向下飘是什么原因
1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起签线的波动。通常影响示签检测漏、电导检测器、较低灵敏度的某外检测器或其它光电类检测器。)控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换错图,流动相不均匀。(流动相条件交化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
2、使用HPLC级的溶剂,高纯度的益和添加剂.流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦.
3、流通池被污染或有气体。用甲解或其他强极性溶剂冲洗流通池.如有霉要,可以用1N的薪酸。(不要用益酸)
4、检测器出口阻鉴。(高压造成流通池留口破裂,产生嗓音基线).取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化。更改配比或流速,为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时。用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质剂配成。流动相污染、变质或由低品质深剂配成检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂8、样品中有强保贸的物质(高K’值)以领头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
8、使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定别用强溶剂冲洗柱子。使用循环溶剂,但检测器未调整。
9、三新设定荟线,当检测器动力学范国发生交化时,使用新的流动相。
扩展资料:
高效液相色谱为色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。
在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。
高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
参考资料来源:百度百科-高效液相色谱
2019-08-06 广告
然后说到基线往下飘,最容易想到的就是流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:
1. 流动相有没有混合均匀。
2. 环境温度是否比较高,流动相瓶的瓶口有没有盖起来。如果温度较高,又敞口放置,有机相挥发得较快,因此流动相中的配比也在逐渐的发生变化。
3. 第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做梯度洗脱,那么泵的运行是否异常。这一点可以查看最近一次的校验记录,看看误差是否在允许范围内。
目前我就想到这些,希望能有些帮助。
只要看几点
1 等度时候压力稳不稳。压力不稳就是可能泵的问题或混合器的问题。基线不稳基本不会和流动相气泡什么的有很大关系。
2 看泵停掉的情况下检测器响应电压稳不稳。如果不稳检测器问题,基本上自己很难解决。
3 色谱柱问题这个说来就复杂了但是我想你不可能就1根柱子吧。