Question

细胞生物学论述题

试述显示细胞内DNA的原理和方法？

Answer 1

先染色，然后在荧光显微镜(比如共聚焦)下看.
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测[1]。因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。当DAPI与双股DNA结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm，其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。DAPI也可以和RNA结合，但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果，其发散光的波长范围约在400nm左右。

DAPI的发散光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein, GFP）或Texas Red染剂（红色荧光染剂）的发散波长，仅有少部分重叠，研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，因此DAPI对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。