Question

质粒，目的基因酶切后分离纯化再连接，是指酶切液经过一系列处理后连接还是指跑过电泳的凝胶块进行连接啊

Answer 1

质粒，目的基因酶切后，酶切液琼脂糖凝胶电泳，将含目的条带的凝胶切下来，进行胶回收，然后再在连接酶的作用下，4度和16度都可以（看你的目的基因的情况决定），将目的基因与目标质粒连接在一起。

追问

跑电泳不是用一点酶切液吗，那剩下的酶切液怎么做，不用岂不是浪费啊

追答

不是用一点，是全部点样。用一个大一点的梳子，把样品全部点进去。

Answer 2

先将酶切产物进行电泳，割下电泳条带，用凝胶回收处理试剂盒回收DNA（这个也可称为纯化），然后用T4连接酶将回收好的DNA与质粒进行连接，重组质粒就构建好了