基因工程运载体的必备条件
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基因工程中使用的运载体一般是从大肠杆菌中提取的质粒,此外还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。运载体一般要具备以下条件:
1、要有启动子、终止子(都是有特殊结构的DNA片段)。
2、要有标记基因(能把已经导入目的基因的细胞筛选出来。一般都是抗性基因。也就是说运载体上有标记基因(抗性基因),把这种运载体导入受体细胞了,受体细胞就能在特殊的培养液中成活,否则细胞就不能成活。)
3、要有一个或多个酶切位点,限制酶要从酶切位点把运载体切开,这样目的基因才能导入
4、在细胞中能够进行自我复制(跟条件1一样,说启动子和终止子一般是回答基因表达载体都应具备哪些条件。)
5、对受体细胞无害
1、要有启动子、终止子(都是有特殊结构的DNA片段)。
2、要有标记基因(能把已经导入目的基因的细胞筛选出来。一般都是抗性基因。也就是说运载体上有标记基因(抗性基因),把这种运载体导入受体细胞了,受体细胞就能在特殊的培养液中成活,否则细胞就不能成活。)
3、要有一个或多个酶切位点,限制酶要从酶切位点把运载体切开,这样目的基因才能导入
4、在细胞中能够进行自我复制(跟条件1一样,说启动子和终止子一般是回答基因表达载体都应具备哪些条件。)
5、对受体细胞无害
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1.具有自我复制的能力。
2.具有标记基因。
3.对宿主细胞无害,不影响其正常的生命活动
4.具有一个或多个酶切位点
2.具有标记基因。
3.对宿主细胞无害,不影响其正常的生命活动
4.具有一个或多个酶切位点
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载体的条件:
1. 能够携带外源目的基因, 必须有多克隆位点;
2. 能够容易筛选重组质粒和基因工程体,必须具有相应的筛选标记;
3. 能够在在大肠杆菌或其它细菌中繁殖,必须具有细菌的自主复制功能;
4. 能够在目标受体生物中稳定存在和表达,必须具有目标受体生物的自主复制功能或染色体整合。
1. 能够携带外源目的基因, 必须有多克隆位点;
2. 能够容易筛选重组质粒和基因工程体,必须具有相应的筛选标记;
3. 能够在在大肠杆菌或其它细菌中繁殖,必须具有细菌的自主复制功能;
4. 能够在目标受体生物中稳定存在和表达,必须具有目标受体生物的自主复制功能或染色体整合。
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1)具有一个或多个限制酶切点,以供外源基因插入其中;
2)具有标记基因,以鉴定重组是否进入受体细胞;
3)能自我复制,否则可能导致重组丢失;
4)对受体细胞无害;
5)大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大不便操作。
2)具有标记基因,以鉴定重组是否进入受体细胞;
3)能自我复制,否则可能导致重组丢失;
4)对受体细胞无害;
5)大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大不便操作。
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