Question

基因组文库构建的方法与过程分别是什么？！

Answer 1

方法：限制性酶切法、机械剪切法
过程：1．载体DNA片段的制备
.2． 供体DNA片段的制备
细胞中总DNA分离纯化 机械剪切法 分离特定大小DNA片段
限制性酶切 分离特定大小DNA片段
3. 供体与载体DNA连接
4. 重组DNA分子的转移和基因组文库的扩增
利用转化或感染方法将连接DNA分子导入宿主细胞，让其自主复制，重组DNA分子被扩增（重组子比率可能发生变化）
5. 基因组文库质量的评价
1）文库规模----随机挑取一些转化子或重组子，提取质粒DNA，电泳测定插入片段大小，然后根据上述公式计算文库大小。
2）重组频率----频率越高，质量越高，可大大减轻后续筛选基因工作量。

Answer 2

首先获取供体细胞中的DNA---用限制酶切割成许多DNA片段---并将其插入载体---并导入受体菌群（基因组文库）外源DNA扩增，产生特定性状分离目的基因。