Question

简述目的基因获取的方法

Answer 1

目的基因的获取方法主要有以下2类
（1）已知基因的获得 PCR分离法和化学合成法等
（2）未知基因的获得 直接分离法和基因文库分离法等
直接分离法
1、限制性内切酶法
用限制性内切酶把基因组DNA切成不同大小的片断
应用对象 适合于从简单的基因组中分离目的基因 如质粒或病毒的大小只有几千碱基 大的也超不过几十万碱基 编码基因比较少 获得也比较简单
（1）对已定序列的DNA分子 只需要用已知识别序列的限制内切酶进行一次或几次切割 分离纯化所需要的DNA片断 与适当载体连接
（2）对已知定位的目的基因 只要根据目的基因两侧的已知的酶切识别位点 一次就可以获得
（3）即使含目的基因的DNA分子未定序或定位 也只须通过酶切分析 随后再通过部分酶切 构建一个简单的基因文库 从钩出目的基因