Question

在基因工程中，用双酶切目的基因和质粒时怎么保证目的基因和载体的定向连接？难道不会再出现其他连接吗？

Answer 1

同一种酶切的末端可以相连接在一起，如果质粒的左端和目的基因的左端用同一种酶切，二者的右端用另一种相同的酶切，那么就可以实现定向连接了。

追问

那么质粒与质粒的左端不会连接吗？还有目的基因与目的基因的同一端不会连接吗？急、急、急

追答

可能有连接，但是较少，在酶切鉴定，或者测序鉴定后可以将其排除。

Answer 2

如果只以单酶切割。会使目地基因或质粒自我连接。形成环状结构。但用双酶的话就可以避免这个问题啦。

Answer 3

不同的酶切获得黏性末端不同，不同的黏性末端不能相连，如果直插入一个片段那么插入片段的方向是确定的。