真核质粒转染与脂质体转染有什么不同?
真核质粒转染与脂质体转染有什么不同经常看到siRNA的真核质粒的构建以及脂质体的转染,但不知二者有什么不同?因为目的基因的siRNA可直接通过脂质体转染给真核细胞,过程应...
真核质粒转染与脂质体转染有什么不同
经常看到siRNA的真核质粒的构建以及脂质体的转染,但不知二者有什么不同?因为目的基因的siRNA可直接通过脂质体转染给真核细胞,过程应该较真核质粒的构建的转染要简单且经济得多,但为什么有些人喜欢用真核质粒的构建的转染方法呢?其有什么优势或其他的价值意义? 展开
经常看到siRNA的真核质粒的构建以及脂质体的转染,但不知二者有什么不同?因为目的基因的siRNA可直接通过脂质体转染给真核细胞,过程应该较真核质粒的构建的转染要简单且经济得多,但为什么有些人喜欢用真核质粒的构建的转染方法呢?其有什么优势或其他的价值意义? 展开
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转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA。
两种转染方法在功能上是一致的。但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内)。而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生shRNA,然后不断产生新的siRNA,因此维持作用的时间长(可以超过两周)。
另外用质粒还可以同时转入报告基因作为对照,确定质粒确实已经转染进去了。
两种转染方法在功能上是一致的。但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内)。而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生shRNA,然后不断产生新的siRNA,因此维持作用的时间长(可以超过两周)。
另外用质粒还可以同时转入报告基因作为对照,确定质粒确实已经转染进去了。
利穗科技
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