下图是细菌DNA和质粒的电泳图,marker很正常,dna和质粒作为太严重了。麻烦哪位大仙帮分析一下,谢谢!
从下到上依次是:marker、大肠质粒、阪歧质粒、大肠DNA、阪歧质粒、阪歧DNA、大肠质粒。附:1、大肠确定有质粒,阪歧没有质粒。2、3为柱式碱法提取;4、5、6、7为...
从下到上依次是:marker、大肠质粒、阪歧质粒、大肠DNA、阪歧质粒、阪歧DNA、大肠质粒。
附:1、大肠确定有质粒,阪歧没有质粒。2、3为柱式碱法提取;4、5、6、7为磁珠法提取。2、最后一条质粒为什么没提取出来呢? 展开
附:1、大肠确定有质粒,阪歧没有质粒。2、3为柱式碱法提取;4、5、6、7为磁珠法提取。2、最后一条质粒为什么没提取出来呢? 展开
2个回答
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1、Marker没问题,说明胶和电泳没有问题,问题出在提取的产品上。
2、基因组拖尾严重,一部分在孔内没有电泳出来,一部分跑到了前端,说明提取过程中蛋白污染,DNA纯度低,另外,部分DNA被降解成小分子的片段,提取条件需要优化。
3、质粒没有提出来,原因有很多可能,比如菌量不够,菌长老了,质粒被降解,等等,重新摇菌提取是惟一的办法。
2、基因组拖尾严重,一部分在孔内没有电泳出来,一部分跑到了前端,说明提取过程中蛋白污染,DNA纯度低,另外,部分DNA被降解成小分子的片段,提取条件需要优化。
3、质粒没有提出来,原因有很多可能,比如菌量不够,菌长老了,质粒被降解,等等,重新摇菌提取是惟一的办法。
追问
2和7是同一个取自同一个样品,只是2是用柱式碱法试剂盒提取的,7是用磁珠法试剂盒提的。所以应该不是样品的问题。
追答
提取条件和方法对于相同样品的得率是存在差异的。7中在低分子量处有条带,很可能是被降解了
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