电泳图跑出后如何通过条带跑的距离来计算目的基因的分子量,需要具体的步骤,我跑的条带跟MARKER对不上 20
3个回答
展开全部
其实做的多了,根本就不会去计算,只要大致看一下在marker的那两条带之间即可,反正那种计算本身也不准,也是近似结果。所以无需要特别计算,如果你的条带是5点几kb,刚好在1kbmaker的5、7kb之间偏下,基本上即可确定扩增出来了,如果不在两者之间,计算也没用,你扩的可能是非特异带
追问
我扩的带是950bp,在750和1000之间,关键是本应该偏于1000却偏向750,所以想要算一下分子量,请问有具体的办法吗
追答
你用的是Marker II吧?如果是950bp,一般就应该在1000bp附近,你说的这种情况,也不需要计算了,试着提高退火温度再扩增一下吧!另外再看看你的引物设计是不是有问题!我最近克隆启动子,就是引物设计的有问题,前后扩了很多次,结果一直扩不出我要的2.2kb,经过分析发现原来我设计的引物的后引物3‘端在要扩增的序列中有多处5~8bp的重复,最后我想了些方法才解决
推荐律师服务:
若未解决您的问题,请您详细描述您的问题,通过百度律临进行免费专业咨询