电泳图跑出后如何通过条带跑的距离来计算目的基因的分子量,需要具体的步骤,我跑的条带跟MARKER对不上 20

因此想要计算一下跑出来的这条带是不是我的目的条带,寻求高手帮助... 因此想要计算一下跑出来的这条带是不是我的目的条带,寻求高手帮助 展开
yuqw19945
推荐于2017-12-15 · TA获得超过2115个赞
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其实做的多了,根本就不会去计算,只要大致看一下在marker的那两条带之间即可,反正那种计算本身也不准,也是近似结果。所以无需要特别计算,如果你的条带是5点几kb,刚好在1kbmaker的5、7kb之间偏下,基本上即可确定扩增出来了,如果不在两者之间,计算也没用,你扩的可能是非特异带
追问
我扩的带是950bp,在750和1000之间,关键是本应该偏于1000却偏向750,所以想要算一下分子量,请问有具体的办法吗
追答
你用的是Marker II吧?如果是950bp,一般就应该在1000bp附近,你说的这种情况,也不需要计算了,试着提高退火温度再扩增一下吧!另外再看看你的引物设计是不是有问题!我最近克隆启动子,就是引物设计的有问题,前后扩了很多次,结果一直扩不出我要的2.2kb,经过分析发现原来我设计的引物的后引物3‘端在要扩增的序列中有多处5~8bp的重复,最后我想了些方法才解决
bianbenjamin
2012-12-13 · TA获得超过2172个赞
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如果是已知蛋白,直接看marker就行了,如果是位置蛋白,可以通过凝胶软件计算
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wayocal
2012-12-13 · TA获得超过1362个赞
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只能根据marker算个大概啊
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