Question

DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么

Answer 1

电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑：
1、PCR产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.
对策：①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.
以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案

Answer 2

原因有以下：
1、 可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度；
3、可能是原液浓度太大造成的；
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer，文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多，可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适，可以将电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应 ＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高，可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染，可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性，电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

Answer 3

Answer 4