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溴酚蓝 二甲苯青 琼脂糖凝胶电泳 紫外下出现黑色条带 是什么问题

Answer 1

溴酚蓝
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3,3′,5,5′-四溴苯酚磺酞。一种pH 指示剂，在pH 3.0~4.6范围，颜色由黄变蓝。常用做电泳指示染料，凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。
中文名
溴酚蓝
英文名
Bromophenol blue;Albutest
别 称
四溴苯酚磺酞
化学式
C19H10Br4O5S
分子量
670.02
CAS登录号
115-39-9
目录
1 基本信息
2 CAS编号
3 性状描述
4 物理参数
5 用途说明
6 贮藏运输
7 危险说明
8 配置方法

溴酚蓝基本信息
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【中文全称】3，3′，5，5′-四溴苯酚磺酰酞
【别名】 四溴苯酚磺酞

【英文名称】Bromophenol blue;Albutest
【英文别名】 3,3,5,5-Tetrabromophenolsulfonephthalein; BPB; Tetrabromophenoltetrabromosulfonephthalein; Bromophenol Blue (0.1% in water); Bromophenol blue solution; Bromphenol Blue; tetrabromophenolsulphonephthalein
【分子式】C19H10Br4O5S
【相对分子量或原子量】670.02
【性状】 从乙酸及丙酮混合液中析出者为长六角形棱柱状结晶。近似黄色或浅玫瑰色结晶性粉末，微溶于水及乙醚，溶于乙醇或稀碱液及氨液中呈蓝色。PH变色范围 3.0(黄)~4.6(蓝紫)
【溶解情况】 微溶于水，易溶于甲醇、乙醇和苯，可自由溶于氢氧化钠溶液，同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。
【用途】 pH指示剂，pH=3.0时呈黄色，pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。
【制备或来源】 将苯酚磺酰酞悬浮于醋酸中，然后徐徐加入溴，并使溴过量，在搅拌下，于50℃进行反应而得。
【其他】 溴酚蓝分解温度279℃，在210℃绿色升华物退色为橙色。

溴酚蓝CAS编号
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CAS编号：115-39-9

溴酚蓝性状描述
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浅黄色到棕黄色粉末；易溶于氢氧化钠溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水(约0.4g/100ml)；最大吸收波长422nm

溴酚蓝物理参数
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熔点:273℃(dec.)(lit.)

溴酚蓝用途说明
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配置溴酚蓝指示液。用途：变色范围：pH2.8-4.6（黄-蓝），酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。

溴酚蓝贮藏运输
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密封阴凉干燥保存

溴酚蓝危险说明
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安全等级:22-24/25
安全术语
S22Do not breathe dust.
切勿吸入粉尘。
S24/25Avoid contact with skin and eyes.
避免与皮肤和眼睛接触。

溴酚蓝配置方法
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方法1：1%的溴酚蓝
将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。
方法2：0.05%的溴酚蓝
配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法：
0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。
方法3：1%溴酚蓝
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。