Question

测序的详细原理，需要什么准备知识吗？

Answer 1

测序分为常规测序和高通量测序。
1.Sanger法测序的原理
就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。
2.高通量测序技术（High-throughput sequencing）又称“下一代”测序技术（"Next-generation" sequencing technology），以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。
高通量测序，不同的测序平台，测序原理是不同的。可以参考一下：http://www.majorbio.com/Products/High_Throughput_Sequencing

Answer 2

测序分常规测序（通常指第一代测序仪）和高通量测序（通常指第二代测序仪），请问你想了解哪一种呢？

Answer 3

你想问哪种测序？是sanger测序还是高通量测序？如果是高通量测序，你指其中的哪一种？