质粒dna提取中加入溶液二后,为什么溶液变得粘稠

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原因:变了性的DNA和蛋白 加入溶液II后,菌体裂解,蛋白和DNA变性并溶解。导致整个溶液非常粘稠,能拉出丝来。

加入溶液二为碱处理。其中NaOH主要是为了溶解细胞,释放DNA,因为在强碱性的情况下,细胞膜发生了从双层膜结构向微囊结构的变化。SDS与NaOH联用,其目的是为了增强NaOH的强碱性,同时SDS作为阴离子表面活性剂破坏脂双层膜。

本步骤注意事项:

第一,时间不能过长,因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断也会慢慢断裂;

第二,加溶液二后,操作一定要温和,剧烈混合会导致基因组DNA污染。

扩展资料

质粒提取窍门:

1、洗脱时60℃温育(Ellution Buffer)洗脱缓冲液或去离子水效果更好。

2、菌体应彻底悬浮 , 如果没有彻底悬浮菌体,则残留的菌体团块在溶液 II 加入后,变成难以完全裂解的团块。这个团块在溶液 III 加入后,会有一部分蛋白质继续存在于溶液中,成为蛋白质残留的最大根源。

3、测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

参考资料来源

百度百科-质粒抽提

百度百科-质粒DNA纯化

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