质粒dna提取中加入溶液二后,为什么溶液变得粘稠
2022-09-28 · 百度认证:北京惠企网络技术有限公司官方账号
关注
展开全部
原因:变了性的DNA和蛋白 加入溶液II后,菌体裂解,蛋白和DNA变性并溶解。导致整个溶液非常粘稠,能拉出丝来。
加入溶液二为碱处理。其中NaOH主要是为了溶解细胞,释放DNA,因为在强碱性的情况下,细胞膜发生了从双层膜结构向微囊结构的变化。SDS与NaOH联用,其目的是为了增强NaOH的强碱性,同时SDS作为阴离子表面活性剂破坏脂双层膜。
本步骤注意事项:
第一,时间不能过长,因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断也会慢慢断裂;
第二,加溶液二后,操作一定要温和,剧烈混合会导致基因组DNA污染。
扩展资料
质粒提取窍门:
1、洗脱时60℃温育(Ellution Buffer)洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
2、菌体应彻底悬浮 , 如果没有彻底悬浮菌体,则残留的菌体团块在溶液 II 加入后,变成难以完全裂解的团块。这个团块在溶液 III 加入后,会有一部分蛋白质继续存在于溶液中,成为蛋白质残留的最大根源。
3、测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
参考资料来源
已赞过
已踩过<
评论
收起
你对这个回答的评价是?
中科雷鸣
2024-11-08 广告
2024-11-08 广告
作为中科雷鸣(北京)科技有限公司的工作人员,我们公司提供血液基因提取试剂盒。该试剂盒采用独特的磁珠和缓冲液系统,能有效从血液样品中分离纯化高质量基因组DNA。特殊包被的磁珠对目的DNA具有很强的亲和力,能在条件改变时快速释放吸附的DNA,实...
点击进入详情页
本回答由中科雷鸣提供
推荐律师服务:
若未解决您的问题,请您详细描述您的问题,通过百度律临进行免费专业咨询
广告 您可能关注的内容 |