直接滴定法测定还原糖的原理
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直接滴定法测定还原糖的原理如下:
将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时,立即生成蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时,二价铜即被还原为一价的氧化亚铜沉淀。样品经除去蛋白质后,
在加热条件下,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。以亚甲基蓝作指示剂,在终点时,稍过量地还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。最后根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量,以及测定样品液所消耗的体积,计算还原糖含量。
还原糖滴定注意事项:
碱性酒石酸甲、乙液与还原糖反应是定量关系,它们的多少直接影响测定结果的多少,从而影响检测数据,所以碱性酒石酸甲、乙液必须精确吸取,保证每次取样量一致。
影响碱性酒石酸铜甲、乙液吸取误差的因素:碱性酒石酸铜甲、乙液在吸管中刻度液面的位置要保持一致。吸管外壁残留的液体多少会造成碱性酒石酸甲、乙液取样量的误差,所以要习惯性地对吸管外壁的碱性酒石酸甲、乙液进行相同处理,保证每次外壁残留液相对一致,从而减少液体取样量的误差。
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