简诉革兰染色法的结果及意义?
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革兰氏染色法是由丹麦病理学家克里斯汀·革兰氏于1884年创立的,是细菌学中一种重要的鉴别染色方法,因为通过这种方法可以将细菌分为两类:革兰氏阳性菌(G)和革兰氏阴性菌(G-)。原理:G-菌:细胞壁较厚,肽聚糖网状分子形成通透屏障。当乙醇脱色时,肽聚糖脱水,毛孔收缩,因此结晶紫-碘复合物保留在细胞膜上。它是紫色的。G ⑥细菌:肽聚糖层薄,交联疏松。用乙醇脱色也不能使其结构收缩。它的脂肪含量很高。乙醇溶解了脂肪,差距就扩大了。结晶紫-碘络合物溶出细胞壁,番红染料溶液重染后呈红色。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染四个步骤。具体操作方法是:(1)固定滑道。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌,均匀涂布在干净的载玻片上,然后在火焰上加热,杀死细菌,使其粘附固定。(2)草酸铵结晶紫染色1分钟。(3)用自来水冲洗,去除浮色。(4)用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倒掉多余的溶液。(5)用乙醇(95%)或丙酮酸等中性脱色剂脱色30秒,革兰氏阳性菌不褪色但呈紫色,革兰氏阴性菌褪色但无色。酒精脱色是整个过程中最关键的一步。(6)用藏红花染料溶液或沙黄重新染色30秒,革兰氏阳性菌仍为紫色,革兰氏阴性菌为红色。革兰氏阳性菌不同于革兰氏阴性菌。
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