Question

PCR跑不出条带

我是一名学生，现在在做PCR，我已经从人的全血中提取DNA，浓度一般在5,或6μg/ml，有的几个浓度很高，有40，或50μg/ml,当时提取DNA时，我也做了电泳，都有条带。这几天做PCR，做了十多个了，就做出来了一组，引物应该没有问题（我查了文献，有学者做过，我用的以前文献中的引物），整个反应体系温度，也都是按着相关资料设计好的。是怎么回事呢？请交各位大侠，老师！

Answer 1

PCR没有产物的原因可能有：
1）引物参数及引物和模板的匹配；
2）模板的质量，可以用其他引物作为阳性对照；
3）反应条件；
4）酶失活；
5）电泳条件；

根据你的说法，引物和PCR条件应该是没有问题的，那么没有条带，是完全是黑的还是很弥散拖着的呢？你应该考虑一下酶是否失活的问题，或者是胶的浓度合不合适，电泳液是不是该换了。