PCR产物电泳严重拖带 50
以连接产物纯化后为模板进行PCR,电泳从电泳孔严重拖带,同样的体系和条件,之前都能扩增出来,现在要不然就是出现地毯式拖带,要么样品就积聚在点样孔跑不动,请问这两者是什么原...
以连接产物纯化后为模板进行PCR,电泳从电泳孔严重拖带,同样的体系和条件,之前都能扩增出来,现在要不然就是出现地毯式拖带,要么样品就积聚在点样孔跑不动,请问这两者是什么原因,谢谢实验大神。
展开
1个回答
2017-09-18 · 专注各类elisa试剂盒、血清抗体
南京金益柏生物科技有限公司
南京金益柏生物科技有限公司是一家专业从事“自主产品研发生产、技术服务、知名品牌代理”的高新技术生物公司,提供各类elisa试剂盒,抗体,标准品,血清、实验技术服务等
向TA提问
关注
展开全部
有可能是你的胶点样孔不整齐,就是你做胶的时候胶没有凝固好,你可以试试重新做块胶。
PCR拖带产生原因有很多,不知道楼主属于哪一种:
1、退火温度较低,可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,30-35循环应该足够了
PCR拖带产生原因有很多,不知道楼主属于哪一种:
1、退火温度较低,可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,30-35循环应该足够了
11
2024-08-28 广告
2024-08-28 广告
北京索莱宝科技有限公司的PCR纯化试剂盒,专为高效、精准地去除PCR反应体系中的杂质及引物二聚体而设计。该试剂盒操作简便快捷,能够有效回收并纯化目的DNA片段,提升后续实验如克隆、测序等步骤的准确性和成功率。其高纯度特性保障了科研结果的可靠...
点击进入详情页
本回答由11提供
推荐律师服务:
若未解决您的问题,请您详细描述您的问题,通过百度律临进行免费专业咨询