Question

发酵工程配制培养基时需要将哪些成分单独除菌,为什么

Answer 1

1、配制培养基时需要将哪些成分单独除菌，为什么？灭菌时的过高温度常对培养基造成不良影响。如：1.出现混浊和沉淀(天然培养基成分加热沉淀出大分子多肽聚合物；培养基中Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、Sb等阳性离子与培养基中的可溶性磷酸盐共热沉淀)。2.营养成份破坏或改变(酸度较高时淀粉、庶糖、乳糖或琼脂灭菌过程易水解;pH7.5,0.1MPa灭菌20min，葡萄糖破坏20%，麦芽糖破坏50%，若培养基中有磷酸盐共存，葡萄糖转变成酮糖类物质，培养液由淡黄色变成红褐色，破坏更为严重。3.pH7.2时培养基中的葡萄糖、蛋白胨、磷酸盐在0.1MPa灭菌15min以上可产生对微生物生长的某种抑制物。4.高压蒸汽灭菌后培养基pH下降0.1--0.3。5.高压蒸汽灭菌的过程会增加冷凝水，降低培养基成份浓度。对于前三种不良影响，可采用低压灭菌(如在0.056MPa、30min灭菌葡萄糖溶液)，或将培养基几种成份分别灭菌，临 用前无菌混合(如磷酸盐与Ca、Mg、Fe、Zn、Cu等阳性离子溶液)的方法，特殊情况可采用间歇灭菌、过滤除菌(如维生素溶液)。工业发酵中采用的连续加压灭菌法(135--140摄氏度，5--15s)和连续蒸煮法。毕赤酵母培养基磷酸盐是分开灭的，而且磷酸盐配制时很难溶解，需要加热。在发酵生产中，有很多发酵培养基的成分不能放在一起高温灭菌；葡萄糖和氨基化合物发生褐变反应；磷酸盐与金属离子产生沉淀；有时避免营养物质在加热的条件下，相互作用，可以将营养物质分开消毒。有些物质由于挥发和对热非常敏感，就不能采用湿热的灭菌方法3.某些加热易分解的成分如氨基酸、生长激素等不得高温灭菌，只能过滤除菌。4.铁、铜等易水解的金属盐类添加剂必须与培养基分开灭菌，稍凉再混合。否则会形成沉淀。4.含葡萄糖的培养基，必须将葡萄糖和培养基分开灭菌后，稍凉再混合。2、 简述手提式灭菌锅操作步骤。一、把内层锅拿出来,第二,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角架相平为宜。不要忘记加水，同时水量不能加得太少，防止灭菌锅烧干而引起爆炸事故。
二、把内层锅放进去，并且装入待灭菌物品（内装培养基或小的三角瓶），不要装得太挤，以免妨碍汽流通影响灭菌效果，三角瓶口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋温包口的纸而透入棉塞。三、加上盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内，再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个棉栓，使螺栓松紧一