Question

elisa都有什么类型，分别适用与检测哪些物质

Answer 1

　夹心法

夹心法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为:

将具有专一性之抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体

加入待测检体，检体中若含有待测之抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一之一次抗体，与待码盯配测抗原进行键结

洗去多余未键结一次抗体，加入带有酵素之二次抗体，与一次抗体键结

洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果

　　间接法

间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：

将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原。

加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结。

洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

　　竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：

将具有专一性之抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体

加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

加入带有酵素之抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酵素之抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。

洗去则巧检体与带有酵素之抗原，加入酵素受质使酵素呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酵素的抗原越少，显色也就越浅。

当需迟指要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。