Question

如何判别蜂王浆质量的优劣？

Answer 1

国家规定蜂王浆分为优等品、一等品、合格品三个等级。检验方法分为感官检验和理化检验两个方面，蜂王浆质量标准见表8。

表8 蜂王浆质量标准

表8 蜂王浆质量标准（续）-1

（1）感官检验

凭蜂王浆的颜色、状态、气味、滋味，用目测、口尝、鼻嗅等方法检验。

①水分测定——减压加热干燥法：

主要仪器：减压干燥箱、称量瓶、干燥器、万分之一天平。

测定步骤：精确称取蜂王浆试样1～2克，置于已恒重的称量瓶中，放入干燥箱，在温度为75℃，压力为-0.097～-1.00兆帕斯卡，干燥至恒重，取出称量瓶，置于干燥器中，冷却30分钟后称重。以下列公式计算：

式中 W₁——称量瓶和样品的重量（克）；

W₂——称量瓶和样品干燥至恒重的重量（克）；

W₃——称量瓶的重量（克）。

平行试验允许误差不超过0.5%，取平均值确定结果。

②粗蛋白测定——凯氏定氮法：

主要仪器：凯氏烧瓶、半微量法蒸馏装置一套、滴定装置一套、万分之一天平。

试剂：

浓硫酸（分析纯）。

硫酸铜与硫酸钾混合剂：称取硫酸铜（化学纯）1克，硫酸钾（化学纯）10克，置于研钵中混合均匀，研细备用。

混合指示剂：量取0.1%甲基红乙醇溶液2份，0.1%溴甲酚绿乙醇溶液3份，临用时混合。

2%硼酸吸收液：称取硼酸（化学纯）2克，量取混合指示剂2毫升，乙醇20毫升于锥形瓶中，加蒸馏水至100毫升，混合均匀，备用。

40%氢氧化钠溶液。

稀硫酸：量取浓硫酸5.7毫升，加蒸馏水稀释至100毫升。

0.1摩尔/升盐酸标准溶液的配制与标定：

配制：量取浓硫酸（分析纯）溶液9毫升，加蒸馏水稀释至1000毫升，摇匀备用。

标定：精确称取在270～300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15克，置于150毫升锥形瓶中，加入蒸馏水50毫升，使其溶解，再加入甲基红、溴甲酚绿混合指示剂（按粗蛋白项配制）10滴，用盐酸溶液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色为终点。以下式计算：

M=W/V×0.106

式中 M——盐酸溶液的摩尔浓度；

V——滴定消耗盐酸溶液的量（毫升）；

W——无水碳酸钠的重量（克）。

测定步骤：

消化：精确称取蜂王浆约1克，放入干燥的50毫升凯氏烧瓶中，加入硫酸钾混合剂2克，再沿瓶壁缓缓加入浓硫酸61毫升，充分混合，在瓶口放一小漏斗，使烧瓶成45度斜置，开始用弱火缓缓加热，使溶液温度保持在沸点以下，等泡沸停止后，逐步加大火力，沸腾至溶液成澄明的绿色后，再继续加热30分钟，放冷备用。

蒸馏：量取2%硼酸溶液10毫升，置100毫升锥形瓶中，加入混合指示剂2滴和少量的稀硫酸，将冷凝管尖端浸入液面下，而后将凯氏烧瓶中内容物经由漏斗移入蒸馏瓶中，用少量蒸馏水淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液25毫升，用少量蒸馏水再洗漏斗数次，关闭橡皮管夹，加热圆底烧瓶进行蒸气蒸馏，当硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏10分钟后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗1分钟，用少量蒸馏水淋洗尖端后，停止蒸馏。

滴定：将吸收液用0.01摩尔/升盐酸标准溶液滴定至由蓝绿色变为灰紫色为终点，并用空白试验校正。以下式计算：

粗蛋白（%）=（V₁-V₂）×M×0.014/W×D×6.25×100

式中 V₁——样品消耗0.01摩尔/升盐酸标准溶液毫升数；

V₂——空白试验消耗0.01摩尔/升盐酸标准溶液毫升数；

M——盐酸标准溶液的摩尔浓度；

0.014——1毫升1摩尔/升盐酸标准溶液相当于氮的克数；

W——样品的重量（克）；

D——样品的稀释倍数；

6.25——氮换算成蛋白质的系数。

平行试验允许误差不超过±0.2%，取平均值确定结果。

③酸度测定——电位滴定法：

主要仪器：电位滴定计、滴定管、烧杯、万分之一天平。

试剂：0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液。

标定：精确称取105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6克，置于150毫升锥形瓶中，加新沸过冷却的蒸馏水50毫升，振摇使其溶解，加入酚酞指示剂2滴，用氢氧化钠溶液缓缓滴定至溶液显粉红色为终点，按下列公式计算：

M=W/V×0.2042

式中M——氢氧化钠溶液的摩尔浓度；

V——滴定消耗氢氧化钠溶液的量（毫升）；

W——邻苯二甲酸氢钾的重量（克）。

测定步骤：精确称取蜂王浆试样约1.2克，置于100毫升烧杯中，加入新沸过已冷却的蒸馏水75毫升，用0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液滴定至pH为8.3，并在1分钟内不变色为终点，以下式计算：

酸度=V/W×10

式中 V——滴定试样所消耗的0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液毫升数；

W——试样重量（克）。

平行试验允许误差不超过±0.5毫升，取平均值确定结果。

④10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）的测定：

仪器：VIS911A紫外可见分光光度计。

试剂：甲醇（分析纯）、10-HDA标准品。

标准溶液配制：精确称取10-HDA标准品12.5毫克，用甲醇溶解并定容于250毫升的容量瓶中。

检样制备：精确称取蜂王浆100～200毫克，用甲醇溶解并定容于100毫升容量瓶中，用干燥漏斗将溶液过滤于预先干燥的150毫升的带塞三角瓶中，分别吸取1.0毫升，用甲醇稀释至10.0毫升，备用。

测定步骤：标准曲线绘制：精确吸取标准液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0毫升分别置于25毫升容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇为空白对照，用1厘米厚石英池在205±1纳米处测每个浓度的吸光度，并绘制标准曲线。

样品检测：用上述同样方法测定样品的吸光度，然后从标准曲线上查出相应浓度并按下式换算出重量的百分比。

10-HDA（%）=C×稀释倍数×100/W×1000×100%

式中 C——由标准曲线上求得的10-HDA的样品浓度（微克/毫升）；

W——样品重（毫克）。

⑤淀粉测定（定性分析）：

试剂：1.3%碘液：称取碘1.3克，碘化钾3.6克，置于200毫升烧杯中，加蒸馏水30毫升，再加盐酸1滴，溶解后加蒸馏水至100毫升，摇匀，置棕色瓶中备用。

测定步骤：称取蜂王浆约0.2克，置于50毫升烧杯中，加入蒸馏水10毫升，加热煮沸，冷却至室温，加入1.3%碘液数滴，不得显蓝色。若显蓝色则证明蜂王浆中掺有淀粉。

⑥总糖测定——斐林氏法：

试剂：

斐林氏A液：精确称取结晶硫酸铜（CuSO₄·5H₂O，分析纯）34.64克，先用少量蒸馏水溶解，再用蒸馏水稀释至500毫升，摇匀过滤后，备用。

斐林氏B液，精确称取酒石酸钾钠（C₄H₄KNaO₆·4H₂O，分析纯）173克和氢氧化钠50克，先用少量蒸馏水溶解，再用蒸馏水稀释至500毫升，摇匀，2天后备用。

标定：精确吸取斐林氏A及B溶液各5毫升，置于150毫升锥形瓶中，加蒸馏水10毫升，置于电炉石棉网上加热至沸腾，用0.5%无水葡萄糖液趁热滴定至蓝色即将褪尽，加入次早基蓝指示剂2滴，继续加热至沸腾，趁热继续滴定至蓝色消失为终点。按下式计算：

T=W×V₁/V₂

式中 T——10毫升斐林氏试液相当于葡萄糖的重量（克）；

W——无水葡萄糖的称取重量（克）；

V₁——滴定消耗无水葡萄糖溶液的毫升数；V₂——无水葡萄糖定容的毫升数。

0.5%葡萄糖溶液。

次甲基蓝指示剂：精确称取次甲基蓝0.1克，加蒸馏水溶解并稀释至100毫升，贮于棕色瓶中。

浓盐酸（分析纯）。

28%氢氧化钠溶液。

蜂王浆试样溶液制备：精确称取蜂王浆试样约3克，置于100毫升容量瓶中，加入蒸馏水50毫升，再加入浓盐酸5毫升，置水浴锅中在68～70℃下水解10分钟迅速冷却至室温，用28%氢氧化钠溶液中和至pH6～8，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，过滤后备用。

测定步骤：精确吸取斐林氏A液及B液各5毫升，置250毫升锥形瓶中，加蒸馏水10毫升，置电炉上加热至沸腾，用蜂王浆试样溶液趁热滴定至蓝色即将消失，加入次甲基蓝指示剂两滴，再加热煮沸，趁热继续滴定至蓝色消失为终点。

计算公式：

式中M——试样重量（克）；

V——滴定时消耗蜂王浆试样溶液毫升数；

T——10毫升斐林氏试液相当于葡萄糖克数。

平行试验允许误差不超过±0.2%。取平均值确定结果。