Question

磁珠法通用核酸提取的操作步骤有哪些？

Answer 1

产品特点

◎操作简便快速，可在30分钟内获得理想的核酸，适用于较多样本的批量提取；

◎提取核酸纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.8-2.0；

◎采用自主研发的改性硅基磁珠，同样的样本量提取的核酸更多。

产品介绍

BIOG Routine NA Mag-B Kit是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取口腔拭子、泌尿生殖道拭子、细胞悬液、组织悬液、唾液、尿液和水样等样本核酸的试剂盒。BIOG Swab NA采用独特的裂解液配方，细胞裂解快速彻底，核酸提取效率高。试剂盒采用了我们自己研发的改性硅基磁珠，核酸吸附能力强，提取核酸纯度高。试剂盒操作简便快速，特别适用于一次试验较多样本的批量提取。与同类产品相比，提取得到的核酸纯度更高，产量更大，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于各种PCR检测和常规分子生物学实验。

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管。

2. 取出洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：按终浓度30%的比例加入无水乙醇，如21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液B：按终浓度70%的比例加入无水乙醇，如9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。

c) 请按需配制洗涤液，尽量不要多配。配制后的洗涤液如一次使用不完，可严格密封后放于室温阴凉处保存，1周内使用完毕。

3. 取1.5mL离心管，加入0.2mL 裂解液、20μL 消化液，再加入0.2mL样本，振荡混匀，65℃温育10 分钟。

4. 冷却到室温，加入0.2mL异丙醇，充分混匀。再加入20μL磁珠复合液（每次使用前须充分混匀），振荡混匀3min（注意不要颠倒混匀，以防磁珠粘附于管盖内壁）。

5. 将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。.

6. 加入0.5mL配制后的洗涤液A，将离心管从磁力架上取下，中速振荡2min，确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

7. 加入0.5mL配制后的洗涤液B，将离心管从磁力架上取下，中速振荡2min，确保磁珠完全分散。再将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

8. 将离心管从磁力架上取下，开盖，干燥约3-5min，至无明显乙醇气味 (注意乙醇要挥发干净)。

9. 加入40 μL洗脱液，振荡至磁珠充分散开，60℃温育2min，振荡混匀30 sec。

10. 将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中，提取的核酸可直接用于下游实验，或-70℃保存

备用。

注意事项：

1、本试剂盒与1.5mL离心管磁力架配套使用，可选用BIOG 多功能通用磁力架。

2、本试剂可用于DNA提取，也可用于RNA提取，试剂盒内液体已经去RNA酶处理，但如用于RNA提取，实验所用器具也应除去RNA

酶，实验中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般50μLRNA溶液加入3μL。）

3. 裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻，洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀。