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叶绿体中色素提取的原理是:由于光合色素位于叶绿体中的囊状结构(繁注:即类囊体)上,要把它提取出来必须破坏叶表皮、细胞壁和细胞膜、叶绿体的双层膜,所以要剪碎后加二氧化硅研磨,以便使色素充分被提取。又因为叶绿体的色素不溶于水,但可溶于有机溶剂中,所以还要加入丙酮使色素溶解,来提取各种色素。另外还要加碳酸钙以保护叶绿体中的色素,原因是加碳酸钙以调节液体的pH,防止叶绿素被破坏。叶绿体中的色素溶解于有机溶剂如酒精或丙酮(相似相溶),形成色素液。
分离的原理与四种色素在层析液中的溶解度有关。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,由于四种色素的化学组成和结构不同,因此每一种色素分子在层析液分子的作用下,克服色素分子之间的引力,向层析液中扩散的速度不同,即在层析液中的溶解度不同,因而四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同,其中胡萝卜素在层析液中的溶解度最高,扩散速度最快,其次是叶黄素、叶绿素a,叶绿素b溶解度最低,扩散得最慢。依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素在扩散中分离开来。
提取
1.剪碎
2.加二氧化硅研磨 关键!!
3.加入丙酮使色素溶解
4.碳酸钙以保护叶绿体中的色素 关键!!
分离
1。研磨充分
2。滤纸上画的线要细,或点要小些, 不能浸入层析液。
分离的原理与四种色素在层析液中的溶解度有关。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,由于四种色素的化学组成和结构不同,因此每一种色素分子在层析液分子的作用下,克服色素分子之间的引力,向层析液中扩散的速度不同,即在层析液中的溶解度不同,因而四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同,其中胡萝卜素在层析液中的溶解度最高,扩散速度最快,其次是叶黄素、叶绿素a,叶绿素b溶解度最低,扩散得最慢。依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素在扩散中分离开来。
提取
1.剪碎
2.加二氧化硅研磨 关键!!
3.加入丙酮使色素溶解
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本回答由迈杰提供
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有很多注意的地方,只要做好可,是可以把四条带都提出来的。首先加二氧化硅后,要加碳酸钙(起保护作用,防止色素被破坏),在装氧化铝时要慢一些,使其均匀并且表面是平的,最关键的是层析时速率的掌控,是你四条带能否全部析出的关键,速率太慢,则时间太久。如果太快,则只能析出三条带。速率是多少我忘了,但实验课本或老师肯定会告诉的,照那个做就可以,一定不要太急。并在整个过程中随时补充层析液,使得层析液始终没过上层的氧化硅。
这是我做此实验时总结的,希望对你有所帮助。
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研磨充分
溶解到位
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