要使平板菌落计数准确 需要掌握哪几个关键
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一、平板划线分离法 由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。 二、稀释倒平板法 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 一 ∶ 一0 、 一 ∶ 一00 、 一 ∶ 一000 、 一 ∶ 一0000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 四5 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 稀释涂布法: 优点:可以计数,可以观察菌落特征。 缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。 一般用于平板培养基的回收率计数!! 稀释混合平板法: 优点:可以计数,吸收量为一ml,较方便。 优点:不能观察菌落特征。 一般用于菌落总数的计数!! 平板划线法: 优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离!!缺点:不能计
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