Question

蛋白质鉴定实验

Answer 1

实验一 生物组织中脂肪,蛋白质的鉴定
一,实验原理
(1)鉴定实验设计的理念:
某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合物 产生特定的颜色反应.
(2)具体原理:
1、脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.
2、蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应.
二,目标要求
初步掌握鉴定生物组织中脂肪,蛋白质的基本方法.
三,重点,难点
1.重点
①初步掌握鉴定生物组织中脂肪,蛋白质的基本方法.
②通过实验的操作和设计培养学生的动手能力,掌握探索实验设计技巧,从而培养创新思维能力.
2.难点
根据此实验方法,原理,设计实验来鉴定常见食物的成分.
四,实验材料
1.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h).
2.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白).
五,仪器,试剂
1.仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜.
2.试剂：1苏丹Ⅲ染液;2双缩脲试剂;3 体积分数为50%的酒精溶液;4蒸馏水.
六,方法步骤
（1）脂肪的鉴定
脂肪的鉴定步骤:
取材:花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄...实验一 生物组织中脂肪,蛋白质的鉴定
一,实验原理
(1)鉴定实验设计的理念:
某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合物 产生特定的颜色反应.
(2)具体原理:
1、脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.
2、蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应.
二,目标要求
初步掌握鉴定生物组织中脂肪,蛋白质的基本方法.
三,重点,难点
1.重点
①初步掌握鉴定生物组织中脂肪,蛋白质的基本方法.
②通过实验的操作和设计培养学生的动手能力,掌握探索实验设计技巧,从而培养创新思维能力.
2.难点
根据此实验方法,原理,设计实验来鉴定常见食物的成分.
四,实验材料
1.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h).
2.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白).
五,仪器,试剂
1.仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜.
2.试剂：1苏丹Ⅲ染液;2双缩脲试剂;3 体积分数为50%的酒精溶液;4蒸馏水.
六,方法步骤
（1）脂肪的鉴定
脂肪的鉴定步骤:
取材:花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片
取理想薄片
在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液
去浮色
制成临时装片
观察:先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.
结论:细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色.
实验成功的要点:
①.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h).
②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片.
③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min,时间不宜过长,以防细胞的其他部分被染色.
（2）蛋白质的鉴定
蛋白质的鉴定步骤:
选材:卵清稀释液或黄豆(浸泡1-2d) 豆浆 滤液

结论:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应.
2,实验成功的要点:
①蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液).
②双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).
③还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起.

Answer 2

先将双缩脲试剂A加入组织样液，振荡均匀（必须营造碱性环境），再加入双缩脲试剂B，摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
　　
双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。