PH7.4的磷酸盐缓冲溶液配制?
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pH7.4 的等渗磷酸盐缓冲液( PBS )的配制
A1 pH7.4 的等渗磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.4,PBS):
NaCI 8.0g
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4〃12H2O 2.9g
KCI 0.2g
将上列试剂按次序加入定量容器中,加适量蒸馏水溶解后,再定容至1000mL,调pH值至7.4, 高压消毒灭菌112Kpa20min,冷却后,保存于4℃冰箱中备用。
A2 棉拭子用抗生素PBS(病毒保存液)的配制:
取上述PBS液,按要求加入下列抗生素:喉气管拭子用PBS液中加入青霉素(2000IU/mL)、链霉素(2mg/mL)、丁胺卡那霉素(1 000IU/mL)、制霉菌素(1000IU/mL)。粪便和泄殖腔拭子所用的PBS中抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后应调pH值至7.4。在采样前分装小塑料离心管,每管中加这种PBS1.0~1.3mL,采粪便时在西林瓶中加PBS1~1.5mL,采样前冷冻保存。
A1 pH7.4 的等渗磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.4,PBS):
NaCI 8.0g
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4〃12H2O 2.9g
KCI 0.2g
将上列试剂按次序加入定量容器中,加适量蒸馏水溶解后,再定容至1000mL,调pH值至7.4, 高压消毒灭菌112Kpa20min,冷却后,保存于4℃冰箱中备用。
A2 棉拭子用抗生素PBS(病毒保存液)的配制:
取上述PBS液,按要求加入下列抗生素:喉气管拭子用PBS液中加入青霉素(2000IU/mL)、链霉素(2mg/mL)、丁胺卡那霉素(1 000IU/mL)、制霉菌素(1000IU/mL)。粪便和泄殖腔拭子所用的PBS中抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后应调pH值至7.4。在采样前分装小塑料离心管,每管中加这种PBS1.0~1.3mL,采粪便时在西林瓶中加PBS1~1.5mL,采样前冷冻保存。
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设配制一升1摩尔/升的磷酸盐缓冲液
pH = pKa2 + Log[摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)]
7.4= 7.2 + Log[摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)]
那么,
(1)摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)=10^0.2
又,
(2)摩尔(K2HPO4)+ 摩尔(KH2PO4)= 1 x 1 = 1 摩尔
解联立方程组(1)和(2)可求出所需的:
摩尔(K2HPO4)和 摩尔(KH2PO4)
再乘以它们的分子量就得到所需的重量了。
pH = pKa2 + Log[摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)]
7.4= 7.2 + Log[摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)]
那么,
(1)摩尔(K2HPO4)/摩尔(KH2PO4)=10^0.2
又,
(2)摩尔(K2HPO4)+ 摩尔(KH2PO4)= 1 x 1 = 1 摩尔
解联立方程组(1)和(2)可求出所需的:
摩尔(K2HPO4)和 摩尔(KH2PO4)
再乘以它们的分子量就得到所需的重量了。
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