Question

测定酶活力要注意控制哪些条件？

Answer 1

（1）酶促反应过程中，要用初速度表示酶促反应速度。

（2）要规定时间、温度、pH等反应条件，并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。

（3）配制的底物浓度应准确且足够大，底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）标本要新鲜，应保存于冰箱中。用血浆时，应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。在采血、分离血清时，应注意防止溶血和白细胞的破裂。

（5）在测定过程中，所用仪器应绝对清洁，不应含有酶的抑制物，如酸、碱及蛋白沉淀剂等。

测定酶活力方法介绍：

终点法：该方式是在特定条件下，将样品中要检知的酶作用一定量的底物，然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。

其一个发展是采用检测器对反应进行连续跟踪，并在反应达到某一程度时，精确地自动记录所需要的时间，这就是酶分析自动化中的固定浓度法；另一个发展是作成简便的酶检测纸片。

动力学法：该方式测定原理是在一定条件下，酶促反应速度和酶浓度成正比，因此测得反应速度就需要求得酶浓度。待测的酶浓度是影响反应速度的唯一因素，其他因素都应处于最适于酶发挥催化作用的水平，为此应选择适宜的底物浓度、缓冲体系、温度，并向反应系统中添加必要的辅助因子。